【導讀】“如何利用超聲波細胞粉碎機來提取葉綠素?”,超聲波細胞粉碎機是一種在液體中產生空化效應,對物質進行處理的多功能、多用途的儀器。下面由小編來為大家講解下。
超聲波細胞粉碎機是一種在液體中產生空化效應,對物質進行處理的多功能、多用途的儀器,能用于動植物組織、細胞、細菌、芽胞菌種的破碎,同時可用來乳化、分離、分散、勻化、提取、脫氣、清洗及加速化學反應等等。該機廣泛應用于生物化學、微生物學、藥物化學、表面化學、物理學、動物學、農學、醫(yī)學、制藥等領域教學、科研、生產。
生物產業(yè)的發(fā)展,應用超聲波細胞粉碎機所做的實驗要求也隨之提高,如對樣品溫度的測定、控制,低溫冷卻樣品及整機的智能化程度的提高等等,都提出了新的要求。
超聲波細胞破碎提取葉綠素的具體步驟:
1.以離心或過濾水樣,在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜。倒人定量體積的水樣進行抽濾,抽濾時負壓不能過大(約為50kPa)。水樣抽完后,繼續(xù)抽1一2min,以減少濾膜上的水分。如需短期保存1一2d時,可放人普通冰箱冷凍,如需長期保存(30d),則應放人低溫冰箱(一20℃)保存。
2.取出帶有浮游植物的濾膜,在冰箱內低溫干燥6一8h,用剪刀剪碎后,放人5ml或10ml離心管中,加人3一4ml90%丙酮,使碎片浸人液面下,放人超聲波容器中用超聲波對樣品進行細胞破碎。(不同時間、不同頻次來比較實驗,便于找出適宜的破碎時間、頻次進行方法統(tǒng)一)。
3.將超聲波進行細胞破碎的樣品用離心機(3000一4000r/min)離心10min。將上清液倒人5ml或10ml容量瓶中。用90%的丙酮定容為5ml或10ml,搖勻。
4.將上清液在分光 光度計上,用1cm光程的比色皿,分別讀取750nm,663nm,645nm,630nm波長的吸光度,并以90%的丙酮作空白吸光度測定,對樣品吸光度進行校正。
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