使用細(xì)胞破碎儀在破碎樣品時一般要選擇低溫多次破碎的,比如冰水浴,2S破碎~2s暫停,其這么做的目的是為防止超聲破碎過程中產(chǎn)生的高溫而引起的酶活性,使蛋白結(jié)構(gòu)等發(fā)生改變。
細(xì)胞破碎儀的原理:主要利用超聲波的原理使細(xì)胞破碎,由于超聲波發(fā)生時會出現(xiàn)空化作用,將使液體形成局部減壓而引起液體內(nèi)部發(fā)生流動,旋渦形成與消失時,會產(chǎn)生很大的壓力使得細(xì)胞破碎?! ?/p>
注意:在使用時不要盲目操作,所有操作要在自己能夠把握的前提下進(jìn)行,不明白的地方可以咨詢服務(wù)人員或查看說明書?! ?/p>
為了避免在溶液中產(chǎn)生泡沫,要將超聲探頭完全置于液面以下,并不接觸的前提下盡可能靠近容器底部。為防止處理液溫度的升高,建議在冰上進(jìn)行,在選擇試管時使用塑料試管,避免使用玻璃試管。在使用過過程中若出現(xiàn)多聚物降解2和蛋白失活,則說明超聲波過強(qiáng),需要減小頻率,若出現(xiàn)超聲沉淀的情況,則說明功率太大,需要調(diào)整功率大小?! ?/p>
細(xì)胞破碎儀利用其超聲作用進(jìn)行樣品破碎的話,一般是破5秒等3秒,超聲3分鐘即可,想要使效果更好,可重復(fù)多次進(jìn)行,切勿一次性超聲時間過長,導(dǎo)致樣品活性受到影響。
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